T/JLFX 017-2025 美国白蛾核型多角体病毒可湿性粉剂

　　ICS 65.020.01 CCS B 65

　　团 体 标 准

　　T/JLFX 017—2025

　　美国白蛾核型多角体病毒可湿性粉剂

　　Hyphantria cunea Nucleopolyhedrovirus Wettable Powder

　　2025-12-30 发布 2025-12-30 实施

　　北京林业有害生物防控协会 发布

　　T/JLFX 017-2025

　　目 次

　　前 言 Ⅲ

　　1 范围 1

　　2 规范性引用文件 1

　　3 术语和定义 1

　　4 产品要求 1

　　5 检测方法 2

　　6 包装与储运 4

　　参 考 文 献 6

　　Ⅰ

　　T/JLFX 017-2025

　　前 言

　　本文件按照GB/T 1.1-2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

　　本文件由北京林业有害生物防控协会提出并归口。

　　本文件由北京林业有害生物防控协会组织实施。

　　本文件起草单位：中国林业科学研究院森林生态环境与自然保护研究所、郑州市林业工作总站、许昌市林业和花木园艺发展中心、濮阳市农林科学院、北京宇悦生物科技有限公司、北京蓝狐天敌技术有限公司。

　　本文件主要起草人：王青华、曲良建、孔德治、 张晓磊、吉洪坤、董文辉、陶婧、马润国、于宏、郭丽娟。

　　Ⅲ

　　T/JLFX 017-2025

　　美国白蛾核型多角体病毒可湿性粉剂

　　1 范围

　　本文件规定了美国白蛾核型多角体病毒可湿性粉剂的产品要求、检测方法、包装与储运。

　　本文件适用于由美国白蛾核型多角体病毒母药与适宜的助剂、载体和填料加工而成的美国白蛾核型多角体病毒可湿性粉剂。

　　2 规范性引用文件

　　下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

　　1

　　GB/T

　　GB/T

　　GB/T

　　

　　1600

　　1601

　　1604

　　

　　农药水分测定方法

　　农药pH值的测定方法商品农药验收规则

　　GB/T 1605-2001 商品农药采样方法

　　GB 3796 农药包装通则

　　GB 4789.2 食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定GB/T 5451 农药可湿性粉剂湿润性测定方法

　　GB/T 6682-2008 分析实验室用水规格和试验方法

　　GB/T

　　8170

　　数值修约规则与极限数值的表示和判定

　　GB/T

　　14825

　　农药悬浮率测定方法

　　GB/T

　　16150

　　农药粉剂、可湿性粉剂细度测定方法

　　GB/T

　　28137

　　农药持久起泡性测定方法

　　LY/T 2906-2017 美国白蛾核型多角体病毒杀虫剂

　　3 术语和定义

　　下列术语和定义适用于本文件。

　　3.1

　　美国白蛾核型多角体病毒可湿性粉剂 Hyphantriacuneanucleopolyhedrovirus wettable powder (HycuNPV WP)

　　由美国白蛾核型多角体病毒(Hyphantriacuneanucleopolyhedrovirus, HycuNPV)母药、载体、填料及助剂经混合、粉碎等工艺加工制成的，易被水润湿并可分散形成稳定悬浮液的粉状剂型。母药的质量应符合LY/T 2906-2017的要求。

　　3.2

　　毒力 virulence

　　美国白蛾核型多角体病毒可湿性粉剂在(25±1)℃ 、湿度≥60%条件下，对美国白蛾 ( Hyphantria cunea)幼虫的致死中时间，以LT50表示。

　　3.3

　　储存稳定性 storage stability

　　美国白蛾核型多角体病毒可湿性粉剂在(20±2)℃、密闭避光条件下储存24个月，其生物效价的稳定性以储存期间校正死亡率的相对下降率表示。

　　4 产品要求

　　4.1 外观

　　T/JLFX 017-2025

　　灰色或灰白色均匀疏松粉末，不应有结块。

　　4.2 技术指标

　　美国白蛾核型多角体病毒可湿性粉剂应符合表1要求。

　　表1 美国白蛾核型多角体病毒可湿性粉剂控制项目指标

　　项目

　　指标

　　美国白蛾核型多角体病毒含量，OBs/g ≥

　　4.0×109

　　菌落数，CFU/g ≤

　　1.0×106

　　水分，% ≤

　　3.0

　　悬浮率，% ≥

　　80.0

　　细度(通过45 μm标准筛)，% ≥

　　98.0

　　pH值范围

　　6.0～7.5

　　湿润时间，s ≤

　　100

　　持久起泡性(1 min泡沫量)，mL ≤

　　20.0

　　毒力a (LT50)，d ≤

　　5

　　储存稳定性b ，% ≤

　　10.0

　　a 正常生产时，毒力试验每3个月进行一次。

　　b 正常生产时，储存稳定性试验每4个月进行一次。

　　5 检测方法

　　5.1 一般规定

　　本文件所用试剂和水在没有标明其他要求时，均指生化试剂和GB/T 6682-2008中规定的三级水。

　　5.2 抽样

　　按GB/T 1605-2001中商品原药采样方法进行，用随机数表法确定抽样的包装件，最终抽样量不少于300 g。

　　5.3 病毒鉴别试验

　　按LY/T 2906-2017中的方法测定。

　　5.4 外观测定

　　在自然光线下，目测可湿性粉剂的颜色和质地。

　　5.5 美国白蛾核型多角体病毒含量

　　按LY/T 2906-2017中的方法测定。

　　5.6 菌落数测定

　　按GB 4789.2中的方法测定。

　　5.7 水分测定

　　按GB/T 1600中的方法测定。

　　5.8 悬浮率测定

　　2

　　T/JLFX 017-2025

　　按GB/T 14825中的方法测定。

　　5.9 湿筛试验

　　称取20.000 g试样，加80 mL水湿润后，采用45 μm标准筛，按GB/T 16150中的湿筛法进行。

　　5.10 pH测定

　　按GB/T 1601中的pH计法测定。

　　5.11 润湿时间测定

　　按GB/T 5451中的方法测定。

　　5.12 持久起泡性的测定

　　按GB/T 28137中的方法测定。

　　5.13 毒力测定

　　5.13.1 材料

　　美国白蛾4龄幼虫。从初孵幼虫开始，累计完成3次蜕皮后，即进入4龄期。

　　5.13.2 测定步骤

　　5.13.2.1 确定LC1oo浓度

　　称取试样1.000 g，加入100 mL水在磁力搅拌器上搅拌10 min分散，再用蒸馏水以5倍~ 10倍等比稀释，浓度梯度设置不少于5个浓度。按LY/T 2906-2017中规定的生物活性检测方法和统计方法，获得校正死亡率为100%的最低试样浓度，确定为用于试验的LC1oo浓度。

　　5.13.2.2 测定时间与死亡率

　　用移液器取LC100浓度样品400 μL，均匀涂抹于饲养食物表面。待饲养食物表面晾干后，将经过24 h饥饿处理、大小一致的健康4龄初幼虫接入养虫杯中，每杯接入15头，每个处理5个重复，共75头。对照为涂布400 μL无菌水。于25℃光照培养箱内饲养，光照强度1000 lx~

　　4000 lx，光周期为16 h光照、8 h黑暗。48 h后更换新鲜未接病毒饲养食物。

　　5.13.2.3 数据记录

　　每24 h观察记录幼虫死亡数，并及时移除死虫。 以镊子轻触虫体无任何反应者为死亡，记录直至所有处理组虫体全部死亡或化蛹。

　　5.13.3 统计计算

　　5.13.3.1 校正死亡率

　　根据对照，按式(1)计算每个观察时间点的校正死亡率W(%)：

　　w

　　式中：

　　T-处理平均死亡率，%

　　C-空白对照平均死亡率，%

　　C≤ 10%，否则实验结果无效。

　　5.13.3.2 回归方程

　　3

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　　将接种后观察时间(d)换算成对数值(X)，将相应时间的校正死亡率(W)换算为死亡几率值(Y)，采用最小二乘法建立回归方程，并对该回归模型进行卡方检验。

　　回归方程：Y=a+bx

　　b ………………………………………..(2)

　　a ………… ………… …………… ………… (3)

　　式中：

　　N-测定的时间点数;

　　X-时间对数值;

　　Y-校正死亡率转换后的几率值。

　　5.13.3.3 LT50计算

　　当Y=5.0(对应死亡率为50%)时，代入回归方程Y=a+bX，求解得到X值。LT50按式(4)计算。

　　LT50=10X (4)

　　5.13.3.4 统计软件

　　LT50 的计算可采用上述计算方法进行，或采用专业的统计软件(如SPSS、R等)进行几率值(Probit)回归分析。两种方法所得结果应一致。

　　5.13.4 允许差

　　重复3次，每次平行测定结果的相对极差应不大于20%。

　　5.14 储存稳定性试验

　　将美国白蛾核型多角体病毒可湿性粉剂在(20±2) ℃储存，每4个月测定校正死亡率，共测定6次。初始校正死亡率和储存试样校正死亡率之间的差值低于10%为合格。

　　5.15 验收

　　符合GB/T 1604的规定。极限数值的处理符合GB/T 8170中数值修约规则。

　　6 包装与储运

　　6.1 标志、标签、包装

　　美国白蛾核型多角体病毒可湿性粉剂的标志、标签应符合GB 3796的规定。包装大小适宜，应采用避光、隔热、密闭的材料，并注明“防高温”“防曝晒 ”等标志。

　　6.2 储运

　　美国白蛾核型多角体病毒可湿性粉剂的包装件应存放在通风、干燥、阴凉的环境中。储运时，温度不高于20℃,湿度不高于60%。严防日晒，不应与食物、种子、饲料混放。

　　6.3 安全

　　在使用说明书或包装袋上，除了标定产品项目的毒性标志和使用方法外，还应有相应的注意事项说明。生产和使用时，应戴防护口罩、手套，穿干净的防护服，避免与皮肤、眼睛接触，防止由口鼻吸入。万一接触皮肤或溅入眼内应及时清洗;如误服，应及时送医院治疗。

　　6.4 质量保证期

　　4

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　　在规定的储运条件下，美国白蛾核型多角体病毒可湿性粉剂的质量保证期，从生产日期算起为两年，毒力不低于标明值。

　　5

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　　参 考 文 献

　　[1] NY/T 2989-2016 农药登记产品规格制定规范

　　[2] Q/HJB 005-2013 棉铃虫核型多角体病毒

　　[3] Q/BHSN 11-2018 5000亿PIB/克棉铃虫核型多角体病毒母药

　　[4] GB 12475-2006 农药贮运、销售和使用的防毒规程

　　6